L'Apistogramma barlowi se distingue de tous ses congénères par une bouche proportionnellement plus imposante munie de mâchoires massives. Le mâle adulte possède des lèvres hypertrophiques. On rencontre deux populations non sympatriques, l'un des sous-genre possède des tâches rouges au niveau de la tête et arbore une teinte globalement plus sombre. L'autre sous-genre est de couleur pâle.
La nageoire caudale du mâle adulte rappelle la forme d'une Lyre. Généralement, la femelle est de couleur jaune avec d'imposantes tâches noires tandis que le mâle est de couleur uniforme.
L'Apistogramma barlowi est un poisson vivant en couple qui réside naturellement à proximité du fond. C'est une espèce au tempérament plutôt calme. L'Apistogramma barlowi est un poisson qui peut devenir agressif à certaines occasions. Il n'apprécie guère la présence d'autres espèces "caractérielles" sur son territoire. Il peut être virulent à l'encontre de ses congénères. Il est généralement paisible avec les poissons non territoriaux. Il devient plus combatif en période de reproduction. Dans ce contexte, il protègera rigoureusement sa ponte et ses alevins contre tout intrus s'approchant de son territoire. Les jeunes sont de tendance grégaires, comme la majorité des poissons.
L'Apistogramma barlowi est un poisson ovipare incubateur buccal.
L'Apistogramma barlowi est un poisson tropical d'eau douce originaire d'Amérique du sud.