Fundulus escambiae est bicolore avec un corps majoritairement argent et noir. Cette espèce est recouverte de petits points noirs qui forment parfois des lignes verticales. Elle possède également une tâche orange autour des yeux qui eux sont marqués par un trait noir vertical.
Les mâles matures sont plus colorés. En période de frai, ils sont facilement repérables à leur posture à leurs parades. Leur nageoire anale est plus longue et plus pointue que chez les femelles.
Ces poissons vivent en petits groupes épars de quelques individus. Les jeunes sont observés en plus grand nombre. Ces poissons résident dans ou à proximité de la végétation, zone propice à la chasse et leur garantissant un abri. Les mâles sont territoriaux, en particulier en période de reproduction. Ils défendent la zone de frai et sont très actifs pour attirer les femelles dans leur territoire.
La reproduction a lieu à la fin du printemps et au début de l'été. A cette période, les mâles sont beaucoup plus colorés. Les œufs sont munis de filaments adhésifs et se fixent à la végétation dès que la ponte a eu lieu. Les mâles fécondent les œufs alors qu'ils sont encore suspendus à la papille génitale de la femelle.
Fundulus escambiae est un killi seulement présent aux États-Unis. Il réside dans les zones marécageuses de Floride et d'Alabama.