L'Otocinclus macrospilus est un petit Loricariidae qui appartient avec les Acestridium et les Hypoptopomma à la sous-famille des Hypoptopomatinae. Comme les autres Loricariidae, des rangées de plaques recouvrent son corps, généralement de petite taille. Ils ont la particularité de pouvoir respirer de l'air grâce à un diverticule à la jonction entre l'œsophage et l'estomac. Il présente généralement 22 à 23 plaques dans une série longitudinale. Il a aussi une bande sombre sur le museau qui s'étire à travers l'œil, jusqu'à l'extrémité des rayons caudaux moyens et qui s'estompe légèrement en amont de la tâche précédant la caudale, de forme circulaire dans son cas. L'ensemble de la zone dorsale présente des motifs tigrés. La nageoire caudale est remarquable par ses 2 bandes verticales.
Comme pour leurs congénères, les Otocinclus macrospilus mâles sont de plus petite taille que les femelles (entre 5 et 10 mm de différence). Les mâles ont un petit organe de contact formé par un tourbillon d'odontodes au bord ventral du pédoncule caudal, près de la base de la nageoire caudale.
L'Otocinclus macrospilus est un poisson vivant en grands groupes qui réside naturellement dans la végétation. C'est une espèce au tempérament calme. Il s'agit d'une espèce très timide et paisible qui a pour habitude de se reposer sur de nombreux objets et qui affectionne les environnements lui apportant de nombreuses cachettes.
L'Otocinclus macrospilus, comme pour le reste des Otocinclus, est un poisson ovipare sur substrat découvert. Les oeufs sont très adhérents et sont le plus souvent réalisés sur de longues feuilles. Les pontes ne sont pas gardées ou protégées par leurs parents.
L'Otocinclus macrospilus est un poisson-chat nain tropical originaire d'Amérique du sud. Il fait partie des espèces d'Otocinclus les plus retrouvés dans le hobbie aquariophile après l'Otocinclus vittatus. Il est souvent commercialisé par erreur, comme pour bon nombre de ses congénères, sous le nom d'Otocinclus affinis ou Macrotocinclus affinis.